Ⅱ級生物安全柜在出廠前就已經(jīng)完成了物理檢測驗證<包括噪聲、照度、向內(nèi)風(fēng)速、下送風(fēng)速、氣流流型等)，生物安全柜在實驗室安裝后，主要是生物學(xué)檢測，它包括人員保護、樣品保護、交叉污染保護和出風(fēng)口泄漏檢測驗證。其中人員保護、樣品保護、交叉污染保護的生物學(xué)檢測可以參照美GG家標(biāo)準(zhǔn)NSF49《Ⅱ級(層流)生物安全柜》或者參照G家食品藥品管理局的《生物安全柜》(YY0569―2005)或者是《生物安全柜應(yīng)用指南――原理、使用和驗證》。

(一)人員保護檢測驗證

合格判定標(biāo)準(zhǔn)：從6個AGI-30采樣器采集到粘質(zhì)沙雷氏菌或枯草芽孢桿菌的CFU數(shù)量，在每次檢測時不得超過10個。采樣時間達(dá)30min時，裂隙式空氣采樣器的平板計數(shù)不得超過5個菌落。必須重復(fù)3次試驗。對照平板必須是陽性結(jié)果。當(dāng)平板含有300個以上的粘質(zhì)沙雷氏菌或枯草芽孢桿菌菌落時，即為陽性。

(二)試驗樣品保護檢測驗證

合格判定標(biāo)準(zhǔn)：每次試驗中，在瓊脂平板上粘質(zhì)沙雷氏菌或枯草芽孢桿菌的菌落數(shù)不得超過5個。必須重復(fù)3次試驗。對照平板必須是陽性結(jié)果。當(dāng)平板含有300個以上的粘質(zhì)沙雷菌或枯草芽孢桿菌菌落時，即為陽性。

(三)交叉污染檢測驗證

合格判定標(biāo)準(zhǔn)：從攻擊側(cè)壁到距離側(cè)壁36cm之間的一些瓊脂平板可以得到粘質(zhì)沙雷氏菌或枯草芽孢桿菌菌落，它們用作陽性對照。每次測試時，在大于38cm中心處的瓊脂平板所得到的菌落總數(shù)不得超過2個。在安全柜的左側(cè)和右側(cè)各做3次重復(fù)實驗。

(四)出風(fēng)口泄漏檢測驗證

出風(fēng)口泄漏檢測是在美G標(biāo)準(zhǔn)NSF49、歐洲標(biāo)準(zhǔn)ENl2469中沒有列出的檢測驗證項目。但是，在對進口的Ⅱ級生物安全柜和G產(chǎn)的Ⅱ級生物安全柜出風(fēng)口泄漏檢測中，發(fā)現(xiàn)確實存在泄漏的情況，且G產(chǎn)的泄漏率比進口的要高。導(dǎo)致出風(fēng)口泄漏的主要原因有兩個：一是HEPA濾器與固定框之間密封不嚴(yán)，二是HEPA濾器在安裝過程中有損傷。對出風(fēng)口的生物檢測驗證可以及時發(fā)現(xiàn)泄漏。

出風(fēng)口泄漏檢測具體操作方法可以《生物安全柜應(yīng)用指南――原理、使用和驗證》的人員保護測試驗證中的氣溶膠發(fā)生，采樣用Andersen 2級采樣器在出風(fēng)口處采樣30min。合格判定標(biāo)準(zhǔn)：每次試驗中，在瓊脂平板上粘質(zhì)沙雷氏菌或枯草芽孢桿菌的菌落數(shù)不得超過5個。必須重復(fù)3次試驗。