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微生物實驗室基本要求

 1.辦公室


實驗室的辦公室是檢驗工作人員辦公、信息查詢和實驗室管理工作的地方,其面積應(yīng)在20m2左右(可根據(jù)人員數(shù)量進(jìn)行調(diào)整),通風(fēng)采光好,內(nèi)設(shè)基本的辦公桌、椅、電腦、打印機(jī)、存放資料和留樣的柜等。檢驗工作人員可以在辦公室里登記待檢驗的樣品、出檢驗報告和處理有關(guān)的文件資料等,也可供工作人員在工作過程中放松休息,以便更清醒地思考、分析和解決問題,極大地提高工作效率。


2.準(zhǔn)備室


準(zhǔn)備室用于配制培養(yǎng)基、藥品和樣品處理等。主要設(shè)備有藥品柜、存放器具或材料的專柜、實驗臺。實驗臺材料應(yīng)以耐熱、耐酸、耐堿為宜。邊臺上放置電爐,藥品柜可分門別類地存放一些一般藥品及試劑。易揮發(fā)刺激性氣味或有害氣體藥品應(yīng)在通風(fēng)櫥中使用。冰箱用于儲存需冷藏的實驗樣品、藥品或試劑。各種玻璃器皿(如試管、燒杯、容量瓶、試劑瓶、錐形瓶、玻璃棒)可分類放置。室內(nèi)需設(shè)有多處水龍頭、下水道、電源插座。準(zhǔn)備室應(yīng)設(shè)有水電總控制閥。


3.洗滌室


洗滌室主要用于洗刷器皿。由于使用過的器皿已被微生物污染.有時還會存在病原微生物。因此,在條件允許的情況下,**好設(shè)置洗滌室。洗滌室應(yīng)設(shè)有洗滌區(qū)、制水區(qū)。室內(nèi)應(yīng)備有加熱器、蒸鍋、超聲波清潔器,及洗刷器皿用的盆、桶等,回收用的廢物缸、廢液缸。還應(yīng)有各種瓶刷、玻璃珠、試管架、晾干架、洗瓶、噴壺、洗滌劑(去污粉、肥皂、洗衣粉、洗潔精)、消毒液(新潔爾滅、酒精、次氯酸、過氧乙酸)。


4.滅菌室


滅菌室是培養(yǎng)基及有關(guān)的檢驗材料滅菌的場所。滅菌設(shè)備是高壓設(shè)備,具有一定的危險性.所以滅菌室應(yīng)與辦公室保持一定距離以保證安全,使用時應(yīng)有專人操作.但也要方便工作,通常設(shè)在通用實驗室附近并與之保持一定距離(如隔一條走廊的距離或小房間的距離).以減少影響。滅菌室內(nèi)安裝有滅菌鍋等滅菌設(shè)備。另外,滅菌室里應(yīng)水電齊備并有防火措施和設(shè)備,人員要遵守安全操作制度。滅菌室主要用于培養(yǎng)基、各種器具及使用后被污染的物品的滅菌,室內(nèi)應(yīng)備有高壓蒸汽滅菌器、干熱滅菌烘箱滅菌設(shè)備。一般產(chǎn)品分裝**包裝容器后再滅菌,也可選用過濾除菌法達(dá)到無菌保證要求。氣體滅菌法是在充有滅菌氣體的高壓腔室內(nèi)進(jìn)行。滅菌室中應(yīng)備有化學(xué)殺菌劑,如重金屬離子、某些強氧化劑、抗生素。


5.更衣室


更衣室是進(jìn)行微生物檢驗時進(jìn)入無菌室之前工作人員更衣、洗手的地方,室內(nèi)設(shè)置無菌室及緩沖室的電源控制開關(guān)和放置無菌操作時穿的工作服、鞋、帽子、口罩等。有時還設(shè)有裝有鼓風(fēng)機(jī)的小型房間,其作用是減少工作人員帶人的雜菌,但相應(yīng)其成本也很高。


6.緩沖室


緩沖室是進(jìn)入無菌室之前所經(jīng)過的房間,安裝有鼓風(fēng)機(jī),以減少操作人員進(jìn)人無菌室時的污染.保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。進(jìn)口和出口通常是呈對角線位置,以減少空氣直接對流造成的污染。要求比較高的微生物檢驗項目如致病菌的檢驗,應(yīng)設(shè)有多個緩沖室。


7.無菌室


無菌室也稱接種室,是系統(tǒng)接種、純化菌種和微生物檢驗過程等無菌操作的專用實驗室。在微生物檢驗工作中,菌種的接種移植是一項主要操作,這項操作的特點就是要保證菌種為純種,防止雜菌的污染。在一般環(huán)境的空氣中,由于存在許多塵埃和雜菌,很易造成污染,對接種工作干擾很大。因此,接種工作要在空氣經(jīng)過滅菌的環(huán)境里進(jìn)行,小規(guī)模的可利用超凈工作臺.大規(guī)模的則在無菌室里操作。無菌室是用于無菌操作的場所,要求密封、清潔.安裝紫外燈和空調(diào)設(shè)備(帶過濾設(shè)備)及傳遞物品用的傳遞小窗,傳遞小窗應(yīng)向緩沖室內(nèi)開口以減少污染和方便工作。另外.無菌室內(nèi)還應(yīng)配備超凈工作臺和普通工作臺。有條件的實驗室可設(shè)置生物安全柜


無菌室設(shè)置及使用的正確與否直接影響了項目檢驗的成?。覀冊谶@里對無菌室進(jìn)行重點介紹。


(1)無菌室的設(shè)置


無菌室應(yīng)根據(jù)既經(jīng)濟(jì)又科學(xué)的原則來設(shè)置。其基本要求有以下幾點:


①無菌室應(yīng)有內(nèi)、外兩間.內(nèi)問是無菌室,外間是緩沖室。房間容積不宜過大,以便于空氣滅菌。內(nèi)間面積2m×2.5m—5m2,外間面積1m×2m=2m2,高以2.5m以下為宜,都應(yīng)設(shè)有天花板。墻壁與地面和天花板連接處無縫隙,不留死角。無菌室六面光滑平整,能耐受清洗消毒。


②內(nèi)間應(yīng)當(dāng)設(shè)拉門,以減少空氣的波動.門應(yīng)設(shè)在離工作臺**遠(yuǎn)的位置;外問的門**好也用拉門,門縫要封緊,兩門應(yīng)錯開.以免空氣對流造成污染。外間的門要設(shè)在距內(nèi)間**遠(yuǎn)的位置。


③在分隔內(nèi)間與外間的墻壁或“隔窗”上.應(yīng)開一個小窗.作接種過程中必要的內(nèi)外傳遞物品的通道,以減少人員進(jìn)出內(nèi)問的次數(shù),降低污染程度。小窗寬60cm、高40cm、厚30cm,內(nèi)外都掛對拉的窗扇。


④無菌室容積小而嚴(yán)密,使用一段時間后,室內(nèi)溫度很高,故應(yīng)沒置通氣窗。通氣窗應(yīng)設(shè)在內(nèi)室進(jìn)門處的頂棚上(即離工作臺**遠(yuǎn)的位置).**好為雙層結(jié)構(gòu),外層為百葉窗,內(nèi)層可用抽板式窗扇。通氣窗可在內(nèi)室使用后、滅菌前開啟,以流通空氣。有條件可安裝恒溫設(shè)備。


(2)無菌室內(nèi)設(shè)備和用具


①無菌室內(nèi)的工作臺,不論是什么材質(zhì)、用途的,都要求表面光滑和臺面水平。光滑是便于用消毒藥劑擦洗,水平是在倒瓊脂平板時可以保證培養(yǎng)皿內(nèi)平板的厚度一致。


②在內(nèi)室和外室各安裝一個紫外燈(多為30W)。內(nèi)室的紫外燈應(yīng)安裝在經(jīng)常工作的座位正上方,離地面2m,外室的紫外燈可安裝在外室中央。


③外室應(yīng)有專用的工作服、鞋、帽、口罩、盛有來蘇爾水的瓷盆和毛巾、手持噴霧器和5%石炭酸溶液等。


④內(nèi)室應(yīng)有酒精燈、常用接種工具、不銹鋼制的刀(剪、鑷子)、70%的酒精棉球、工業(yè)酒精、載玻片、特種蠟筆、記錄本、鉛筆、標(biāo)簽紙、膠水、廢物筐等。


⑤試管、培養(yǎng)皿、槍頭、錐形瓶、EP管等器皿和培養(yǎng)基均可用高壓蒸汽滅菌器滅菌:shou先將待滅菌的器皿或培養(yǎng)基分裝好,用報紙包裹嚴(yán)實.通過棉線捆扎牢固,避免空氣污染。檢查滅菌器中蒸餾水量是否充足,檢查每個閥門及開關(guān)是否工作正常,然后將待滅菌的物品放入高壓蒸汽滅菌鍋.打開電源.調(diào)制溫度和時間。干熱滅菌箱可用于制藥行業(yè)的西林瓶、安瓿瓶、鋁蓋、金屬及玻璃器皿件滅菌去熱原和固體物料干燥滅菌。


8.恒溫培養(yǎng)室


每一類微生物生長所需的溫度范圍各不相同,且各有其**適溫度。如果溫度較低,則微生物代謝低下,生長緩慢。如果溫度適宜,則微生物代謝旺盛,生長快。如果溫度太高,則會因為高溫導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性,使酶失去活力而抑制生長,甚**引起死亡。恒溫培養(yǎng)室就是對接種微生物提供恒定適宜溫度進(jìn)行培養(yǎng)的場所。


(1)培養(yǎng)室的設(shè)置


①培養(yǎng)室應(yīng)有內(nèi)、外兩間,內(nèi)室是培養(yǎng)室,外室是緩沖室。房間容積不宜太大.以利于空氣滅菌.內(nèi)室面積在3.2m×4.4m=14m2左右,外室面積在3.2m×1.8m=6m2左右,高以2.5m左右為宜,都應(yīng)有天花板。


②分隔內(nèi)室與外室的墻壁上部應(yīng)設(shè)帶空氣過濾裝置的通風(fēng)口,使內(nèi)室有良好的空氣供應(yīng),以滿足好氧微生物對氧的需要。


③為滿足微生物對溫度的需要.需安裝恒溫恒濕機(jī)。恒溫恒濕機(jī)的主機(jī)部分應(yīng)安裝在內(nèi)室以外。


④內(nèi)外室都應(yīng)在室中央安裝紫外燈,以供滅菌用。


(2)培養(yǎng)室內(nèi)設(shè)備及用具


①內(nèi)室通常配備培養(yǎng)架和搖瓶機(jī)(搖床)。常用的搖瓶機(jī)有旋轉(zhuǎn)式、往復(fù)式兩種。


②外室應(yīng)有專用的工作服、鞋、帽、口罩、手持噴霧器和5%石炭酸溶液、70%酒精棉球等。


③培養(yǎng)室的滅菌、消毒。同無菌室的滅菌、消毒措施。小規(guī)模的培養(yǎng)可不啟用恒溫培養(yǎng)室,而在恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行。


9.通用實驗室


通用實驗室是進(jìn)行微生物檢驗準(zhǔn)備工作和非無菌操作實驗時使用,也可供進(jìn)行微生物的觀察、計數(shù)和生理生化測定及科研工作使用。室內(nèi)的陳設(shè)因工作側(cè)重點不同而有很大的差異。一般均配備實驗臺、顯微鏡、柜子及凳子。實驗臺要求平整、光滑,實驗柜要足以容納日常使用的用具及藥品等。通用實驗室應(yīng)設(shè)有較大的長方形工作臺作為實驗操作臺,臺下設(shè)計了各專用儀器柜,臺面用石板加塑膠墊等不易腐蝕和穩(wěn)固耐用的材料設(shè)置,并設(shè)有專用擱物架。另外,還應(yīng)設(shè)置一個適當(dāng)大小的通風(fēng)櫥,內(nèi)配有排氣系統(tǒng)和安裝給排水系統(tǒng),如水槽及水槽上的各種水龍頭。實驗室的地面設(shè)計為水磨石地面,這樣容易清潔,不易積水,方便工作。實驗室應(yīng)有良好的通風(fēng)照明設(shè)備和消防設(shè)施。通用實驗室為了方便實驗工作的開展,通常配備了常用的儀器(分光光度計、pH計、烘箱、電爐等)及常用的各種玻璃器皿和常用的各種化學(xué)試劑、藥品。此外,還應(yīng)配有清潔用工具和工作服。如果工廠條件許可.檢驗人員可以根據(jù)分工各自擁有專用的實驗工作臺或工作地方,以快速、高效完成檢驗任務(wù)。


教學(xué)用的微生物實驗室,通常按80m2/40人設(shè)計,**好是長方形,應(yīng)設(shè)置講臺、黑板、實驗桌。實驗桌上配有藥品架,在藥品架的適當(dāng)高度安裝日光燈.作為觀察微生物時的光源。


10.實驗室其他要求


總的來說,在非專業(yè)化實驗或條件有限時,準(zhǔn)備室、洗滌室、通用實驗室的劃分并不十分明確.甚**合而為一。在專業(yè)化研究或條件允許的情況下,上述九室**好都單獨設(shè)置。


微生物實驗很重要的一點是要保持實驗的安全性、有效性及連續(xù)性。在實驗室的建設(shè)過程中,要確保水力、電力、動力等的充足供應(yīng),同時要合理安置排污系統(tǒng),便于實驗廢棄物及污染物的排放。